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    Elisa實驗中動物體液收集辦法剖析

    發(fā)布時間: 2017-01-11  點擊次數(shù): 1269次

    Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強(qiáng),ELISA試劑盒重復(fù)性好的試驗確診辦法。因為其試劑安穩(wěn)、易保留,操作簡潔,成果判別較客觀等要素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。那么Elisa試驗中動物體液該怎么搜集呢,以下有上海勁馬生物剖析,期待訂貨我司商品。
    一、血液的搜集
    常用的采血辦法有割(剪)尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈(動脈)采血、股動脈(靜脈)采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學(xué)、后肢小靜脈采血等。
    二、尿液的搜集
    ELISA試劑盒試驗動物的尿液常用代謝籠搜集,也可通過別的設(shè)備來搜集。
    (一)用代謝籠搜集尿液
    代謝籠用于搜集試驗動物天然排出的尿液,是一種格外規(guī)劃的為搜集試驗動物各種排泄物的密封式養(yǎng)殖籠,有的代謝籠除可搜集尿液外,又可搜集糞便和動物呼出的CO2。通常簡單的代謝籠首要用來搜集尿液。防在代謝籠內(nèi)養(yǎng)殖的試驗動物,可通過其特別設(shè)備搜集尿液。
    (二)導(dǎo)尿法搜集尿液
    實施導(dǎo)尿術(shù),較適宜于犬、猴等大動物。通常不需要麻醉,導(dǎo)尿時將試驗動物仰臥固定,用甘油光滑導(dǎo)尿管。對雄性動物,操作員用一只手抓住,另一只手將包皮向下,露出,使尿道口打開,將導(dǎo)尿管緩慢刺進(jìn),ELISA試劑盒導(dǎo)尿管推動到尿道膜部時有反抗感,此刻注意動作輕柔,持續(xù)向膀胱推動導(dǎo)尿管,即有尿液流出。雌性動物尿道外口在陰道前庭,導(dǎo)尿時于陰道前庭腹側(cè)將導(dǎo)尿管刺進(jìn)陰道外口,這以后操作同雄性動物導(dǎo)尿術(shù)。
    用導(dǎo)尿法導(dǎo)尿可搜集到?jīng)]有污染的尿液。假如嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作,可搜集到無菌尿液。
    (三)輸尿管插管搜集尿液
    通常用于請求準(zhǔn)確計量單位時間內(nèi)試驗動物排尿量的試驗。剖腹后,將膀胱牽拉至腹腔外,露出膀胱底兩邊的輸尿管。在兩邊輸尿管近膀胱處用線別離結(jié)扎,于輸尿管結(jié)扎處上方剪一小口,向腎臟方向別離刺進(jìn)充溢生理鹽水的插管,用線結(jié)扎固定插管,即可見尿液從插管滴出,能夠搜集。采尿過程中要用38℃熱生理鹽水紗布隱瞞切斷及膀胱。
    三、骨髓的搜集
    1、大鼠、小鼠骨髓的搜集
    用頸椎脫臼法處死動物,剝離出胸骨或股骨,用注射器汲取少數(shù)的Hank平衡鹽溶液,沖洗出胸骨或股骨中悉數(shù)骨髓液。假如是取少數(shù)的骨髓作查看,可將胸骨或股骨剪斷,將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的玻片上,混勻后涂片涼干即可染色查看。
    2、ELISA試劑盒大動物骨髓的搜集
    狗等大動物骨髓的搜集可采納活體穿刺辦法。先將動物麻醉、固定、部分除毛、消毒肌膚,然后估計好肌膚到骨髓的間隔,把骨髓穿刺針的長度固定好。ELISA試劑盒操作人員用左手把穿刺點周圍的肌膚繃緊,右手將穿刺針在穿刺點垂直刺入,穿入固定后,悄悄擺布旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入,當(dāng)穿刺針進(jìn)入骨髓腔時常有失敗感。狗骨髓的搜集,通常選用髂骨穿刺。狗等大動物常用的骨髓穿刺點:胸骨:穿刺部位是胸骨體與胸骨柄銜接處。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各點的中點。脛骨:穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。假如穿刺選用的是肋骨,穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔,防止發(fā)作氣胸。

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