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    ELISA試劑盒手把手教學(xué)就在今天 你準(zhǔn)備好了么

    發(fā)布時(shí)間: 2016-01-04  點(diǎn)擊次數(shù): 850次

     古人有云:學(xué)知不足,業(yè)精于勤。好的技術(shù)自有不朽的能力??蒲兄肥侨俗叱鰜淼?,怎么走好這條路?學(xué)習(xí)是關(guān)鍵,在學(xué)習(xí)的道路上,只有歷經(jīng)過風(fēng)雨和磨難的人,方能走向人生的。今天特整理一些相關(guān)ELISA技術(shù)教學(xué)文章,下面就讓我們了解如何有效的學(xué)習(xí)ELISA實(shí)驗(yàn)技。
    一,ELISA試劑盒在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍可概括四個(gè)方面:
    1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
    2、研究抗酶抗體的合成。
    3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
    4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。
    二,ELISA試劑盒的基本原理有三條:
    (1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;
    (2)抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
    (3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
    由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。

    四,ELISA試劑盒存在的問題
    從以上的簡(jiǎn)單介紹中可以看出,ELISA法由于本身所具備的*性,是一項(xiàng)很有發(fā)展前途的實(shí)驗(yàn)性與血清學(xué)診斷方法,而且應(yīng)用的領(lǐng)域也越來越廣泛。但是我們認(rèn)為ELISA不是萬應(yīng)良方,用它來代替一切,這是不當(dāng)?shù)摹R驗(yàn)镋LISA法還有局限性:
    1、由于ELISA所用的抗原大部分還是混合的可溶性抗原,所以對(duì)同一微生物寄生蟲或其他物質(zhì)不同部位的抗原還沒有分開。
    2、內(nèi)源性過氧化酶的普遍存在,如人腦組織中,呼吸道分泌物的炎癥細(xì)胞中及某些病毒的組織培養(yǎng)中均有內(nèi)源性過氧化物酶的活力,常不易除去,如果用某些方法除去時(shí),則病毒的抗原性亦受到破壞,對(duì)于用ELISA檢測(cè)不利。
    3、對(duì)ELISA法的非特異性評(píng)價(jià)的資料尚不夠完善,因此,對(duì)出現(xiàn)一些非特異性反應(yīng)的時(shí)候,往往不易解釋。
    4、固相載體的質(zhì)量常不統(tǒng)一,主要是原料及制備工藝還不一致,致使不同批號(hào)的固相載體有時(shí)本底值較高,有時(shí)吸附性能很差,影響試驗(yàn)結(jié)果。
    5、試劑不統(tǒng)一,現(xiàn)在處于“八仙過海,各顯神通”,標(biāo)準(zhǔn)還不能統(tǒng)一。

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