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    ELISA試劑盒樣本試驗預備

    發(fā)布時間: 2018-02-23  點擊次數(shù): 1115次

    ELISA試劑盒樣本試驗預備:
    在搜集樣本前都有必要有一個完好的方案,有必要清楚要檢測的成份是否滿足安穩(wěn)。對搜集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。關于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。標本應防止重復凍融?br />液體類標本:  包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培育上清等。
    1. 細胞培育上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。
    2. ELISA試劑盒培育細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。經(jīng)過重復凍融或參加安排蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成,應再次離心。
    3. 安排標本:切開標本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本消融后依然堅?-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4),或安排蛋白萃取試劑, 用手藝或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。分裝后一份待檢測,其他冷凍備用。
    4. 血清:室溫血液自然凝結10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成,應再次離心。
    5. ELISA試劑盒血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成,應再次離心。
    6. 尿液:用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實施。

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